說(shuō)明

Dual-Luciferase^® Reporter （DLR^™） Assay System （Dual-Luciferase^® 雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)） 為雙報(bào)告基因檢測(cè)提供有效的手段。 在DLR^™ 檢測(cè)中，螢火蟲(chóng)（Photinus pyralis ） 螢光素酶和海腎（Renilla reniformis ） 螢光素酶的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測(cè)。首先檢測(cè)螢火蟲(chóng)螢光素酶，將螢光素酶檢測(cè)試劑II（Luciferase Assay Reagent II, LAR II）加入樣品中，產(chǎn)生的光信號(hào)至少持續(xù)1分鐘。定量螢火蟲(chóng)螢光強(qiáng)度后，再在同一個(gè)樣品中加入Stop & Glo^® 試劑，將上述反應(yīng)終止，同時(shí)啟動(dòng)海腎螢光素酶反應(yīng)。使用帶有試劑自動(dòng)注射器的發(fā)光檢測(cè)儀，可在4 秒內(nèi)完成兩個(gè)檢測(cè)。在DLR^™ 檢測(cè)系統(tǒng)中，兩個(gè)報(bào)告基因產(chǎn)生的線(xiàn)性檢測(cè)的靈敏度均可達(dá)埃摩爾級(jí)（<10-18），在實(shí)驗(yàn)宿主細(xì)胞內(nèi)均無(wú)內(nèi)源活性。而且，DLR^™ 檢測(cè)的一體化模式既可快速定量檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞，也可用于快速定量檢測(cè)無(wú)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄/ 翻譯反應(yīng)體系中的兩個(gè)報(bào)告基因。

為了得到Dual-Luciferase^® 試劑盒的檢測(cè)結(jié)果，Promega推薦使用針對(duì)該檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行過(guò)確證的發(fā)光檢測(cè)儀。這些發(fā)光檢測(cè)儀均帶有DLReady ^™ 標(biāo)識(shí)。請(qǐng)參閱“通過(guò)DLReady ^™ 確證的發(fā)光檢測(cè)儀”頁(yè)面，來(lái)了解相應(yīng)的儀器信息。

pGL4 螢光素酶報(bào)告基因載體是針對(duì)DLR^™ 檢測(cè)系統(tǒng)而設(shè)計(jì)。組成型表達(dá)的海腎螢光素酶載體可與任何實(shí)驗(yàn)用螢火蟲(chóng)螢光素酶載體聯(lián)合共轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

Cat.# E1960 和E1980 產(chǎn)品請(qǐng)注意：系統(tǒng)中已提供了足夠的Passive Lysis Buffer，能夠進(jìn)行96 孔板細(xì)胞的1,000 次檢測(cè)（一般每孔用
20μl 1X PLB）。若需要更多的Passive Lysis Buffer（ 如>100μl/ 孔），可單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)。

特點(diǎn)

• 準(zhǔn)確性更高：使用海腎螢光素酶做內(nèi)對(duì)照可得到更精確的結(jié)果。

• 方便：無(wú)需分開(kāi)樣品，可節(jié)省平板和時(shí)間。

• 靈敏：可用于研究弱啟動(dòng)子，低水平表達(dá)/ 調(diào)控和轉(zhuǎn)染不佳的細(xì)胞的表達(dá)。

• 線(xiàn)性范圍：線(xiàn)性范圍超過(guò)7 個(gè)數(shù)量級(jí)；活性很高的樣品一般無(wú)需稀釋。

儲(chǔ)存于-20℃。